not available fi se
not available 2 not available
www.solunetti.fi
taso 2

Pre-embedding

Pre-embedding tekniikka (suom. esipetausmenetelmä) on immunoelektronimikroskopian perusmenetelmä. Sillä tarkoitetaan leimausmenetelmää, joissa tutkittava kohde paikannetaan solusta tai kudoksesta ennen petausaineeseen valamista ja ohutleikkeiden leikkaamista. Pre-embedding tekniikka soveltuu erityisesti solun pintaosissa sijaitsevien antigeenien paikantamiseen, koska vasta-aineiden ja käytettävien merkkiaineiden täytyy päästä vapaasti diffundoitumaan antigeenin luo. Mitä syvemmällä biologisessa materiaalissa tutkittava antigeeni sijaitsee, sitä suositeltavampaa on käyttää post-embedding tekniikoita.

 

Pre-embedding tekniikan etu verrattuna post-embedding menetelmiin on tutkimuskohteen antigeenisyyden parempi säilyvyys, koska leimaus voidaan antigeenista riippuen tehdä elävälle tai kevyesti fiksatulle solu- tai kudosmateriaalille. Solukalvon läpäisemiseksi näyte täytyy yleensä käsitellä miedolla detergenttiliuoksella, mikä jonkin verran huonontaa hienorakennetta. Antigeenisyyden yleensä tuhoavaa osmiumtetroksidifiksaatiota voidaan käyttää leimauksen jälkeen, mikä puolestaan parantaa solukalvojen säilyvyyttä ja näytteen kontrastia.