not available fi se
1 2 not available
www.solunetti.fi
Etusivu / Näytteenvalmistus / Leikkaaminen
taso 2

Leikkaaminen, snittning, sectioning

Leikkaamisessa huomioitavaa:

1. Tutustu mikrotomiin
2. Pese objektilasit 1% Deconex-liuoksella yön yli, huuhtele ja kuivaa tai käytä kaupallisia valmiita laseja.
3. Käytä tislattua vettä leikkaamisessa.
4. Seuraavia virheitä voi tapahtua lekkaamisessa:

virhe
syy
leike liikkuu vasemmalle tai oikealle  huonosti muotoiltu blokki
pala ei leikkaudu kunnolla
liian kova vaha, liian kylmä huone, liian paksu leike
leike on ryppyinen tylsä veitsi, liian pehmeä vaha, liian lämmin huone, väärä veitsen kulma, valaminen epäonnistunut
leikkeessä reikiä   
lovi veitsessä, ilmakuplia blokissa, kovia kappaleita blokissa, liian kova solukko (esim. luu)
 
Lisää mahdollisia virheitä löytyy esim. kirjasta G. Humason: Animal Tissue Technique
5. Tavallinen leikepaksuus on 5-10 µm.
6. Leike kiinnitetään objektilasille esim. albumiini-glyseroli- tai 1% poly-L-lysiini- liuoksella.

Leikkeen siirtäminen objektilasille

1. Kirjoita leikkeen koodinumero ensin lasille lyijykynällä. Koodi voidaan myös tulostaa suoraan lasille tarkoitukseen kehitetyllä printterillä.
2. Laita objektilasille ohut kerros albumiini-glyseroli-liuosta.
3. Leikkaa noin 1,5 cm pitkiä paloja leikkeestä skalpelilla. Nosta ne objektilasille. Liian pitkät palat on hankala siirtää. Alä puhalla leikkeeseen. (Siirrä objektilasi vedessä kelluvan näytteen alle ja liu'uta näyte lasille. Tällöin saadaan pidempikin leike siirrettyä kokonaisena.)
4. Pistä tislattua kylmää vettä pipetillä leikkeen viereen lasille. Vesi imeytyy leikkeen alle, jolloin näyte alkaa kellua ja sitä voidaan siirrellä lasilla.
5. Laita lasi lämpölevylle (35°C). Leike laajenee ja rypyt tasoittuvat. Lasia ei saa pitää liian kauan lämpölevyllä. Vahan/parafiinin sulaminen pilaa näytteen.
6. Laita leikelasi uuniin (37°C) yön yli. Tällöin leike tarttuu lasiin. Albumiini-glyseroli koaguloituu ja liimaa leikkeen lasiin. Uunin lämpötila ei saa olla korkeampi muutoin vaha/parafiini sulaa ja leike menee pilalle.